铜离子与SALI3-2蛋白的相互作用

• 作者: 唐玉林 徐宏 董一含 贺建芝 郑易之 高占
• 来源期刊: 高等学校化学学报
• 学科: 化学
• 关键词: 铜离子 SALI3-2蛋白 金属离子亲和层析 荧光光谱 圆二色光谱
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 生物化学
• 页码范围: 128-134
• 页数: 7页
• 分类号: Q946|O641.3
• 字数: 4934字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7503/cjcu20120184

摘要

用1/2 MS固体培养基培养拟南芥幼苗,研究了CuCl2对转Sali3-2基因植株生长的影响,发现转基因植株Sali3-2的表达可提高其耐受Cu2+胁迫的能力.进一步克隆Sali3-2基因,表达并纯化了缺失信号肽的SALI3-2蛋白.利用固定金属离子亲和色谱(IMAC)分析发现,Cu2+能够与SALI3-2蛋白结合.通过荧光光谱及圆二色光谱(CD)进一步研究了Cu2+与SALI3-2蛋白间的键合机理.结果表明,Cu2+可引起SALI3-2蛋白内源性荧光猝灭,其猝灭机制为静态猝灭；Cu2+与SALI3-2蛋白的结合常数为8.89×106,结合位点数为1.6.CD分析显示,Cu2+与SALI3-2蛋白的结合未使SALI3-2蛋白二级结构发生明显改变.由此推测,在高浓度铜离子胁迫下,SALI3-2蛋白通过结合一定数量的Cu2+使蛋白的构象发生改变,这可能是SALI3-2蛋白的表达使植物耐受Cu2+胁迫能力提高的分子机制之一.