慢病毒载体介导的NEP1-40在人脐血间充质干细胞中的表达***★

• 作者: 周逸丹 张萍萍 林媛媛 王赛英 葛婷爱 陈赞 黄爱华
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 脐带脐血干细胞 脐血 间充质干细胞 慢病毒载体 转染 NEP1-40 863项目 干细胞图片文章
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 页码范围: 31-37
• 分类号: R394.2
• 字数: 6939字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2013.01.005

摘要

背景:近年来研究证明间充质干细胞具有高度增殖和多向分化潜能,是一种理想的组织工程种子细胞,能高效转染表达外源性目的基因,在基因治疗领域具有广阔的应用前景.目的:将含有NEP1-40基因的慢病毒载体转染脐血间充质干细胞,评价基因转染后脐血间充质干细胞生物学功能变化,观察NEP1-40在脐血间充质干细胞中的表达.方法:体外分离和培养人脐血间充质干细胞,流式细胞仪检测细胞表面标记,并对其生物学特性进行鉴定.同时将NEP1-40基因克隆入慢病毒载体,包装出病毒上清,以不同拷贝数转染脐血间充质干细胞.结果与结论:实验通过密度梯度离心法成功在体外分离和培养脐血间充质干细胞,诱导其向脂肪细胞分化,流式细胞仪检测结果显示脐血间充质干细胞中CD90、CD73及CD105蛋白阳性,不表达CD14、CD34、CD45、CD19、HLA-DR、Stro-1及CD106蛋白;real-time PCR检测发现其NEP1-40 mRNA表达水平与转染拷贝数有关,转染拷贝数越高,NEP1-40的表达量越高,此外转染 NEP1-40后的脐血间充质干细胞中可检测到NEP1-40蛋白,提示NEP1-40基因转染后脐血间充质干细胞原有的生物学功能无明显影响.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林媛媛		4	6	2.0	2.0
2	陈赞	首都医科大学宣武医院神经外科	62	494	11.0	18.0
3	周逸丹		10	58	4.0	7.0
4	张萍萍		7	6	2.0	2.0
5	黄爱华		2	2	1.0	1.0
6	王赛英		3	5	2.0	2.0
7	葛婷爱		1	2	1.0	1.0