变性胶原体外培养模型的建立

• 作者: 刘英开 原博 姜育智 宋菲 王志勇 王西樵 苏荣家 董叫云 陆树良
• 来源期刊: 中华创伤杂志
• 关键词: 烧伤 胶原Ⅰ型 凝胶类 断裂模量
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 353-358
• 页数: 6页
• 字数: 4419字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-8050.2013.4.016

摘要

目的 探讨不同温度对Ⅰ型胶原分子二级结构的影响,确定合适的胶原变性温度,研究热变性后胶原纤维排列及三维凝胶性质的改变,比较胶原变性后不同培养环境成纤维细胞形态差异,以建立变性胶原-细胞体外培养模型. 方法 Ⅰ型胶原蛋白溶液在不同温度作用后通过蛋白质圆二色光谱仪分析胶原分子二级结构改变.扫描探针显微镜观察胶原变性后纤维结构的改变.制备不同种类三维胶原凝胶并通过气相压力仪检测胶原凝胶断裂模量.将变性后的胶原进行二维包被和三维胶原凝胶制作,倒置相差显微镜及光镜下观察不同培养环境下细胞形态变化. 结果 温度达到50℃时,Ⅰ型胶原分子二级结构发生明显改变,在二维胶原包被时可见胶原纤维凝集成团,含变性胶原的三维凝胶断裂模量明显下降.在变性胶原存在环境中培养成纤维细胞,细胞形态均有显著改变. 结论 经50℃作用后Ⅰ型胶原分子二级结构发生明显改变,含变性胶原的三维凝胶断裂模量明显下降,Ⅰ型胶原包被及三维凝胶模型培养的成纤维细胞形态明显不同,可作为变性胶原影响细胞生物学活性的体外模型.