非洲猪瘟病毒VP73结构蛋白表达及鉴定

• 作者: 张春玲 沈志强 王艳萍 董林
• 来源期刊: 家畜生态学报
• 学科: 农学
• 关键词: 非洲猪瘟病毒 VP73结构蛋白 表达及鉴定
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 科学研究
• 页码范围: 62-65
• 页数: 4页
• 分类号: S811.6
• 字数: 2891字
• 语种: 中文

摘要

为获得可作为血清学诊断抗原的体外诱导表达ASFV VP73结构蛋白,根据Gen-Bank登录的ASFV基因序列,人工合成VP73主要抗原表位区基因克隆至pUC57载体中,设计1对引物,PCR扩增获得429 nt的VP73基因片段；将VP73基因片段使用EcoRI和SalI酶切后亚克隆至表达载体pGEX-KG,经PCR、酶切、测序鉴定挑选阳性克隆,转化进表达菌株BL21(DM3)中进行体外诱导表达,SDS-PAGE和Western blot分析蛋白表达及其活性.结果显示,成功构建表达重组载体pGEX-KG-VP73,且诱导有效表达了41Ku重组蛋白,表达量约占菌体总蛋白的35％；Western blot分析表达该蛋白具有良好的表达活性.试验为建立无感染性、快速、敏感的血清学诊断方法奠定了一定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈志强		525	1950	18.0	25.0
5	王艳萍		23	46	4.0	6.0
6	董林		24	76	6.0	7.0
8	张春玲		10	41	3.0	6.0