携改良rHBVpre-S1基因酵母表达载体的构建及其免疫原性鉴定

• 作者: 夏冬 姚晖 徐亮 甘云辉
• 来源期刊: 现代医学
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒 pre-S1基因 免疫原性 酵母表达载体
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 221-225
• 页数: 5页
• 分类号: R512.62
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7562.2013.04.001

摘要

目的:构建携改良rHBVpre-S1基因的酵母表达载体,探讨rHBVpre-S1蛋白的免疫原性.方法:以我国HBV流行株adr的DNA为模板,PCR法扩增HBVpre-S1基因,再应用PCR定点突变技术对HBVpre-S1的抗原决定簇氨基酸的编码基因作无免疫原性修饰,酶切后与酵母穿梭表达载体pGBKT7连接,测序后命名为pGBKT7-rHBVpre-S1,提取转化质粒的酵母蛋白行免疫蛋白印迹分析.蛋白纯化后,以蛋白颗粒行腹腔内注射免疫昆明小鼠,间接ELISA法检测小鼠血清中抗pre-S1抗体的阳性率.结果:成功地构建了携改良rHBVpre-S1基因的酵母表达载体,免疫印迹检测出人rHBVpre-S1蛋白的表达,昆明小鼠经目的抗原免疫5次后其抗体阳性率显著性低于对照组.结论:构建的pGBKT7-rHBVpre-S1基因酵母表达载体兼具嗜肝性及无免疫原性的优势,可为肝病的靶向基因治疗提供理想的载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐亮		79	299	8.0	13.0
2	姚晖		15	71	6.0	8.0
3	夏冬		45	129	6.0	8.0
4	甘云辉		4	3	1.0	1.0