次黄嘌呤核苷酸脱氢酶对猪链球菌2型GN061215生物学特性及蛋白质表达的影响

• 作者: 何孔旺 俞正玉 倪艳秀 周俊明 张雪寒 杨志彪 温立斌 祝昊丹 茅爱华
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪链球菌2型 次黄嘌呤核苷酸脱氢酶 核糖体蛋白质 表达谱芯片
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医·水产养殖
• 页码范围: 114-120
• 页数: 7页
• 分类号: S851.34+7.1
• 字数: 4049字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2013.01.019

摘要

为了了解次黄嘌呤核苷酸脱氢酶(IMPDH)对猪链球菌2型GN061215致病力的影响机制,利用同源重组技术,敲除猪链球菌2型GN061215的impdh基因,重组后的GN061215命名为GN061215(△IMPDH),比较GN061215与GN061215(△IMPDH)培养特性、生化特性、致病力以及基因转录水平差异.结果显示impdh基因敲除后,引起GN061215生长曲线迟缓期延长,降低了GN061215生长曲线平台期OD600峰值,同时截短了GN061215菌株成链长度；GN061215、GN061215(△IMPDH)对46种代谢底物利用能力一致,对2种代谢底物利用存在差异；GN061215(△IMPDH)对Balb/c小鼠的致病力较GN061215菌株有一定程度的下降.SDS-PAGE显示GN061215(△IMPDH)菌体的粗提蛋白质条带较GN061215有显著减少；基因芯片比较GN061215、GN061215(△IMPDH)基因转录差异发现,下调基因中存在36个关联核糖体大、小亚基合成的基因,而在上调基因中不存在该类基因,表明impdh基因的丢失影响了GN061215菌株核糖体大、小亚基的合成,进而显著减少了GN061215菌株菌体蛋白质的表达,这可能与GN061215菌株毒力的下降有关.