早熟砂梨ISSR-PCR反应体系的建立与优化

• 作者: 吴少华 宋燕春 李永裕 陈建烟 黄添毅 龚理
• 来源期刊: 亚热带植物科学
• 关键词: 早熟 砂梨 ISSR 体系优化
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 页码范围: 91-96
• 页数: 6页
• 分类号: Q943.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-7791.2013.02.001

摘要

以我国南方主栽的早熟砂梨品种‘翠冠’Pyrus pyrifolia‘Cuiguan’为材料，对ISSR技术体系中的模板DNA浓度、Taq DNA聚合酶用量、引物浓度、dNTP浓度、Mg2+浓度、退火温度、PCR循环数等7个主要因素进行优化和筛选，建立了适合早熟砂梨的ISSR-PCR反应体系。最终反应体系为20μL体系中10×PCR buffer （不含Mg2+）2μL，模板 DNA浓度60 ng，TaqDNA聚合酶0.75 U，引物浓度1μmol/L，dNTP浓度90μmol/L， Mg2+浓度2.25 mmol/L。扩增程序为：预变性94℃5 m in，变性94℃45 s，退火45 s，72℃延伸1 min，共42个循环，然后72℃再延伸10 min，4℃保存，用1.5%琼脂糖凝胶电泳检测多态性。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴少华	福建农林大学园艺学院	121	789	16.0	23.0
2	陈建烟	福建农林大学园艺学院	8	124	6.0	8.0
3	李永裕	福建农林大学园艺学院	50	381	9.0	18.0
4	龚理	福建农林大学园艺学院	2	5	1.0	2.0
5	黄添毅	福建农林大学园艺学院	5	11	2.0	3.0
6	宋燕春	福建农林大学园艺学院	2	2	1.0	1.0