白念珠菌新型耐药基因MXR1的敲除与鉴定

• 作者: 朱红梅 李平 温海 胡婵 谭宏月 顾军
• 来源期刊: 中国真菌学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 白念珠菌 MXR1基因 基因敲除
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 69-73
• 页数: 5页
• 分类号: R379.4
• 字数: 3286字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建用于白念珠菌MXR1基因敲除的载体质粒,并通过Ura-Blaster策略敲除MXR1两条等位基因.方法 分别扩增白念珠菌MXR1基因ORF两侧上下游的片段,通过酶切与连接反应,将上下游片段分别插入到p5921质粒的hisG-URA 3-hisG盒两端,从而形成MXR1敲除载体质粒pUC-MXR1-URA3.通过Ura-Blaster策略将载体质粒转染到白念珠菌RM 1000内,并采用PCR和Southern-blot杂交方法鉴定各步转染、复筛所得的阳性克隆.结果 成功获得MXR1基因缺失的菌株.结论 MXR1基因缺失菌株的构建,有助于深入研究白念珠菌耐药机制.