大豆查尔酮还原酶基因GmCHR的克隆与植物表达载体构建

• 作者: 刘江 李艳 盖钧镒 赵团结 邢光南 陈沛
• 来源期刊: 大豆科学
• 学科: 农学
• 关键词: 大豆 异黄酮 查尔酮还原酶 基因表达
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 遗传育种·分子生物学
• 页码范围: 139-142
• 页数: 4页
• 分类号: S565.1
• 字数: 3131字
• 语种: 中文

摘要

黄酮类化合物在植物中参与过滤紫外线、固氮和花色形成等过程,异黄酮对人体有抗氧化、预防乳腺癌等保健作用.查尔酮还原酶(chalcone reductase,CHR)是植物中参与黄酮类化合物代谢的重要酶.克隆大豆查尔酮还原酶基因并构建植物表达载体,有助于进一步研究其功能和异黄酮的代谢过程.采用RT-PCR方法,从栽培大豆(Gly-cine mx)南农1138-2中,克隆得到了第14号染色体上的一个编码大豆查尔酮还原酶(chalcone reductase,CHR)的基因,命名为GmCHR.该基因含有948 bp长的编码区序列(Coding DNA Sequence,CDS),编码315个氨基酸.预测其蛋白质分子量为35.5 kDa,等电点为6.32.与其他豆科植物中的查尔酮还原酶相比,GmCHR蛋白序列与葛藤(Puerariae montana)CHR的相似性最高,达94％.组织表达分析表明,在自然生长条件下GmCHR在叶中的表达量最大；其次是种子；在花和茎中相同；在根中的表达量最小.利用Gateway方法获得植物过表达载体pMDC83-GmCHR,经检测表明过表达载体已成功转化农杆菌EHA105,为今后进一步了解GmCHR在大豆异黄酮代谢过程中的功能提供材料基础.