免疫蛋白质组学技术筛选鉴定日本血吸虫雄虫诊断候选抗原

• 作者: 刘晓龙 干小仙 施晓华 朱明东 汤益 王越 马安
• 来源期刊: 国际流行病学传染病学杂志
• 关键词: 血吸虫,日本 免疫蛋白质组学 雄虫 抗原
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 239-243,封3
• 页数: 6页
• 字数: 5481字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4149.2013.04.006

摘要

目的 应用经典的免疫蛋白质组技术筛选、鉴定日本血吸虫雄虫抗原蛋白质,以期获得敏感性高、特异性强的诊断抗原.方法 从人工感染日本血吸虫的家兔门静脉中收集血吸虫雄性成虫,提取可溶蛋白；采用双向凝胶电泳与Western印迹相结合(2-D Western印迹)筛选特异性抗原蛋白质点；MALDI-TOF/TOF串联质谱鉴定各抗原蛋白质；将筛选出的体被抗原、ER Calcistorin基因用PCR扩增后插入到pIVEX 1.4WG和pET-28a载体上,分别用麦胚无细胞表达体系和原核表达系统获得重组抗原,Western印迹鉴定其抗原性.结果 用2-D Western印迹共筛选到36个阳性蛋白质点,其中12个点同时也能与健康兔血清反应；24个特异性抗原蛋白质点经MALDI-TOF/TOF串联质谱鉴定,其中19个(79.2％)在NCBI数据库找到匹配蛋白质数据资料.体被抗原均能在麦胚无细胞体系和原核表达体系中表达；免疫印迹显示麦胚无细胞体系表达的重组蛋白有较好抗原性,检测敏感性90％,特异性100％.结论 基于凝胶电泳的免疫蛋白质组学技术用于诊断抗原筛选、鉴定切实可行；与E.coli原核表达体系相比,麦胚无细胞表达体系表达的重组蛋白具有较好的抗原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱明东	浙江省医学科学院寄生虫病研究所	49	353	10.0	16.0
2	王越	浙江省医学科学院寄生虫病研究所	47	237	9.0	13.0
3	汤益	浙江省医学科学院寄生虫病研究所	18	86	6.0	9.0
4	干小仙	浙江省医学科学院寄生虫病研究所	44	272	9.0	15.0
5	施晓华	浙江省医学科学院寄生虫病研究所	30	141	7.0	11.0
6	马安	浙江省医学科学院寄生虫病研究所	17	45	4.0	6.0
7	刘晓龙	浙江省医学科学院寄生虫病研究所	8	18	2.0	3.0