重组SCIRR39多克隆抗体的制备及检测

• 作者: 倪艳丽 刘少君 李欣
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: 重组SCIRR39抗原表位 原核表达 多克隆抗体 脊髓损伤修复
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 页码范围: 76-79
• 分类号: Q78|R392.1
• 字数: 3421字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2013.01.017

摘要

目的:在大肠杆菌中表达大鼠脊髓损伤与修复蛋白39(SCIRR39)的C端抗原表位,并制备其多克隆抗体.方法:从大鼠脊髓全横断损伤脊髓cDNA中扩增1386 bp的Scirr39基因编码框,亚克隆该基因编码蛋白C端359~461位氨基酸残基的DNA片段,插入表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表达情况,切胶纯化目的蛋白;利用多克隆抗体制备技术,制备重组SCIRR39蛋白的多克隆抗体;用ELISA方法检测抗体效价, Western印迹检测抗体的特异性.结果:SCIRR39蛋白C端抗原表位与GST的融合蛋白在大肠杆菌中以可溶形式高表达,相对分子质量为37.9×103;获得抗SCIRR39蛋白C端抗原表位的兔抗血清,其效价达到1∶104;Western印迹显示多克隆抗体能特异识别重组SCIRR39蛋白的C端抗原表位.结论:在原核系统中表达纯化了重组SCIRR39抗原表位蛋白,制备的重组蛋白多克隆抗体将用于检测SCIRR39在脊髓损伤过程中的表达变化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘少君	军事医学科学院基础医学研究所蛋白质组学国家重点实验室	52	414	9.0	18.0
2	倪艳丽	军事医学科学院基础医学研究所蛋白质组学国家重点实验室	1	2	1.0	1.0
3	李欣	军事医学科学院基础医学研究所蛋白质组学国家重点实验室	11	42	4.0	6.0