利用亲水富集策略分析人血浆中N-糖基化蛋白及N-糖类型

• 作者: 应万涛 张琪 潘一廷 王继峰 钱小红 马成
• 来源期刊: 色谱
• 学科: 化学
• 关键词: 超滤辅助样品制备 亲水相互作用色谱 反相色谱 N-糖基化蛋白 N-糖
• 年，卷（期）: 2013,（11）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1057-1063
• 页数: 7页
• 分类号: O658
• 字数: 4807字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1123.2013.05043

摘要

蛋白质的N-糖基化是最重要的翻译后修饰之一,许多已知的血浆肿瘤诊断标志物及治疗靶标都是N-糖基化蛋白.针对血浆的糖蛋白质组研究有利于发现新的蛋白标志物.然而,血浆蛋白质浓度分布的动态范围非常宽,且同一位点上的糖链存在微观不均一性,影响了血浆中糖蛋白的鉴定效率.本文利用亲水材料ZIC-HILIC制备亲水富集柱分别对人血浆中的N-糖链和N-糖肽进行富集,并结合碱性反相色谱进行肽段的预分离和高准确度质谱分析,最终在健康人的血浆中鉴定到了299个糖基化蛋白、637个糖基化位点,并识别出31种不同的糖型.在这些鉴定到的糖基化位点中,新发现有107个N-糖基化位点(占总位点数的16.8％).本方法操作简单,可以有效富集N-糖肽和N-糖,为在血浆中寻找糖蛋白和糖链生物标志物提供了可靠的手段.