摘要:
目的:观察链脲佐菌素(STZ)所致糖尿病(DM)大鼠下丘脑弓状核(Arc)胃牵张(GD)敏感神经元放电活动及胃运动改变,探讨ghrelin对DM大鼠下丘脑Arc GD敏感神经元放电活动和胃运动的影响.方法:采用STZ腹腔注射诱导DM大鼠模型;通过细胞外记录神经元单位放电和在体胃运动方法,观察ghrelin及其受体阻断剂[D-Lys3]-GHRP-6对DM大鼠下丘脑Arc GD敏感神经元自发放电活动和胃运动的影响;应用real-time PCR和荧光免疫组化方法,探讨DM大鼠Arc内ghrelin受体(GHS-R1a) mRNA及其免疫阳性物的表达.结果:在正常大鼠Arc记录到的98个GD敏感神经元中,64.3%为GD兴奋性(GD-E)神经元,35.7%为GD抑制性(GD-I)神经元.在63个GD-E神经元中,Arc微量注射ghrelin可使其中73.0%神经元兴奋,其放电频率与生理盐水组比较显著增加(P<0.05);而在35个GD-I神经元中,Arc微量注射ghrelin可抑制其中60.0%神经元,放电频率显著降低(P<0.01);ghrelin改变GD神经元放电效应可被ghrelin受体阻断剂[D-Lys3]-GHRP-6阻断(P<0.05);在DM大鼠,Arc记录到的66个GD敏感神经元中有56.1%为GD-E神经元,43.9%为GD-I神经元.Arc注射ghrelin可兴奋其中35.1% GD-E神经元,放电频率与生理盐水比较显著增加(P<0.05);而在29个GD-I神经元中,ghrelin可抑制其中21个神经元(72.4%),放电频率显著降低(P<0.01).与正常大鼠比较,DM大鼠Arc GD敏感神经元中的GD-E和GD-I比例无显著改变(P>0.05),但ghrelin使GD-E神经元兴奋的比率明显降低(P<0.05),放电频率平均增加率也显著下降(P<0.05);但ghrelin使GD-I神经元抑制比率和放电频率平均减少率均无显著改变(P>0.05).在体胃运动研究结果显示,Arc微量注射ghrelin,可显著促进正常和DM大鼠胃运动,且呈显著量效关系(P<0.05,P<0.01),但ghrelin对正常大鼠的促胃运动作用显著强于其对DM大鼠的作用(P<0.05),[D-Lys3]-GHRP-6可完全阻断ghrelin该作用.Real-time PCR研究结果显示,DM大鼠下丘脑Arc GHS-R1a mRNA表达较正常大鼠明显减少(P<0.05);免疫荧光研究进一步证实DM大鼠下丘脑Arc GHS-R1a免疫阳性物表达较正常大鼠明显减少(P<0.05).结论:下丘脑Arc ghrelin参与DM大鼠GD敏感神经元自发放电活动,并参与胃运动的调控,该效应可能是通过作用于ghrelin受体而实现的.