稻曲病菌UV-2菌株细菌人工染色体文库构建及分析

• 作者: 刘庆丽 王晓明 王革娇 罗朝喜 罗美中 谭新球
• 来源期刊: 微生物学通报
• 关键词: 大分子DNA 细菌人工染色体 水稻 稻曲病 稻曲病菌
• 年，卷（期）: 2013,（9）
• 所属期刊栏目: 生物实验室
• 页码范围: 1715-1722
• 语种: 中文

摘要

[目的]稻曲病(Rice false smut)是由稻曲病菌[Villosiclava virens (Cooke) Tak.]引起的严重危害水稻的真菌病害.构建稻曲病菌UV-2的大片段DNA细菌人工染色体(Bacterial artificial chromosome,BAC)文库,为致病相关基因的鉴定及在图位克隆、比较基因组学等方面的研究奠定基础.[方法]以幼嫩菌丝为材料制备大分子基因组DNA包埋块,用Hind Ⅲ部分酶解后经脉冲凝胶电泳筛选,回收大片段DNA并与plndigoBAC536-S载体连接,连接产物转化大肠杆菌菌株DH10B Tl Phage-Resistant细胞后进行蓝白斑筛选,白色菌落捡入384孔板置于-80℃低温保存.[结果]成功构建UV-2菌株的高质量、高覆盖度的BAC文库,该文库共含10 368个克隆,平均插入片段为124.4 kb,空载率小于1‰约覆盖该菌基因组的36.8倍.[结论]克服了真菌大分子基因组DNA制备难控制的技术难题,建立了首个稻曲病菌的BAC文库.该文库已作为一种公共基因组资源向研究者开放(http:∥GResource.hzau.edu.cn).

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谭新球	湖南省农业科学院植物保护研究所	11	29	3.0	5.0
2	王革娇	华中农业大学生命科学技术学院	11	151	7.0	11.0
3	罗美中	华中农业大学生命科学技术学院	10	29	4.0	5.0
4	罗朝喜	华中农业大学植物科学技术学院	6	17	2.0	4.0
5	王晓明	华中农业大学生命科学技术学院	2	10	2.0	2.0
6	刘庆丽	华中农业大学生命科学技术学院	1	7	1.0	1.0