活细胞硫化氢检测新方法

• 作者: 唐朝枢 廖锋 徐国恒 曾强 耿彬 谢静 郑扬
• 来源期刊: 北京大学学报医学版
• 关键词: 硫化氢 细胞 亚甲基蓝 胱硫醚β合酶 胱硫醚γ裂解酶
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 489-492
• 页数: 4页
• 分类号: R33-33
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-167X.2013.03.029

摘要

目的:建立测定活细胞释放微量硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)的简易方法.方法:在细胞培养板盖上方黏附滤膜,细胞释放的硫化氢与滤膜上的醋酸锌反应产生硫化锌,采用亚甲基蓝分光光度法测定并计算细胞释放的硫化氢的量.应用该方法分别检测了HepG2细胞和人脐静脉内皮细胞硫化氢的释放量.结果:HepG2细胞添加L-半胱氨酸以及辅酶磷酸吡哆醛后,继续培养12 h,H2S释放量为(859.39±19.12) nmol/(min·106cells)；给予胱硫醚-γ-裂解酶抑制剂炔丙基甘氨酸(DL-propargylglycine,PAG)后,H2S产率下降到(341.34±105.90) nmol/(min·106cells)；胱硫醚-β-合酶抑制剂间羟胺处理后,H2S产率下降到(375.05±174.50) nmol/(min·106cells)；两种酶抑制剂联合使用后H2S释放量显著抑制,为(204.47±97.14) nmol/(min·106cells).人脐静脉内皮细胞也可内源性产生H2S,HUVEC细胞H2S的释放量为(26.23±3.24) nmol/(min·106 cells),约为HepG2细胞产量的1/30.台盼蓝检测细胞活性大于95％,细胞生长状态良好,表明该方法无细胞毒作用,细胞可根据实验需要继续培养.结论:滤膜吸附法简便易行、实用可靠,可应用于活细胞释放硫化氢的测定.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐国恒	北京大学基础医学院生理学与病理生理学系	47	420	11.0	19.0
2	唐朝枢	北京大学基础医学院生理学与病理生理学系	537	6450	36.0	53.0
3	曾强	中国人民解放军总医院国际医学中心	39	280	9.0	15.0
4	谢静	中国人民解放军总医院国际医学中心	13	80	5.0	8.0
8	廖锋	北京大学基础医学院生理学与病理生理学系	6	30	3.0	5.0
9	郑扬	北京大学基础医学院生理学与病理生理学系	6	74	4.0	6.0