大黄鱼头肾巨噬细胞体外模型的构建

• 作者: 张文兵 徐玮 李庆飞 艾庆辉 郑岳夫 麦康森
• 来源期刊: 水生生物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 大黄鱼 巨噬细胞 吞噬 呼吸暴发 离体
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 页码范围: 885-891
• 页数: 7页
• 分类号: S968.1
• 字数: 1792字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7541/2013.113

摘要

通过优化Percoll密度梯度离心技术，从大黄鱼(Larmichthys crocea)头肾组织中分离纯化巨噬细胞，并优化细胞培养条件。对所分离细胞进行形态学分析、普通光镜和电镜超微结构观察以及细胞功能验证实验。实验结果表明：细胞单层置于22℃无 CO2恒温培养箱中，于 L15培养基中培养5d 后仍保持较高的活力。普通光镜和电镜观察到大黄鱼头肾巨噬细胞具有伪足发生和较强的吞噬能力、胞浆中富含线粒体以及吞噬小泡。巨噬细胞与不同浓度(0、0.1、1、20μg/mL)的脂多糖(LPS，Escherichia coli 055：B5)分别孵育3h和24h。施加LPS刺激后，细胞呼吸暴发活性随LPS浓度以及孵育时间变化而变化。孵育3h后，0.1μg/mL LPS协同PMA可显著诱导巨噬细胞活性氧中间体(ROI)的产生。孵育24h后，所有处理组LPS协同PMA显著抑制细胞ROI的生成(P <0.05)。未添加PMA时,经1μg/mL LPS孵育3h和24h后的巨噬细胞细胞ROI的生成量显著降低(P<0.05),其他LPS处理组间细胞ROI的生成量无显著差异。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	麦康森	中国海洋大学海水养殖教育部重点实验室	137	3188	32.0	49.0
2	徐玮	中国海洋大学海水养殖教育部重点实验室	52	853	18.0	27.0
3	艾庆辉	中国海洋大学海水养殖教育部重点实验室	52	1335	22.0	35.0
4	张文兵	中国海洋大学海水养殖教育部重点实验室	44	769	17.0	26.0
5	李庆飞	中国海洋大学海水养殖教育部重点实验室	1	2	1.0	1.0