人骨髓间充质干细胞体外培养方法的改良

• 作者: 冉茜 叶兴德 李忠俊 相丽欣 肖燕妮 邓小军
• 来源期刊: 中国输血杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓 间充质干细胞 体外培养 诱导 细胞分化 集落
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 间充质干细胞研究与应用专题
• 页码范围: 310-315
• 分类号: R457.7|R329.2+6
• 语种: 中文

摘要

目的 改良人骨髓间充质干细胞(HBMSCs)体外分离培养的方法.方法 采用含体积比为10％胎牛血清的α-MEM培养体系,通过密度梯度离心和贴壁筛选法从人骨髓中分离培养贴壁细胞,流式检测该细胞表面标志物,体外诱导成脂、成骨、成软骨分化并鉴定该细胞的多项分化能力,集落克隆形成和MTT试验检测该细胞的活力和增殖能力,并分别与经典的Dexter长期培养体系比较.结果 采用改良方法从人骨髓中分离、培养出具有塑料底物粘附性的细胞,目的细胞不表达或低表达CD14、CD34、CD45,高表达CD73、CD90、CD105；体外成功诱导脂肪细胞、骨细胞、软骨细胞分化；Dexter-LTC体系培养的集落个数(为8.0±1.0)个、单个集落细胞数为(59.2±8.2)个,改良法培养的集落个数为(11.3±1.53)个、单个集落中细胞数为(66.5±14.4)个(P＜0.05)；在Dexter-LTC培养体系下,BMSCs于培养d10进入对数生长期、d19进入平台期,改良法培养BMSCs d4进入对数生长期、d15进入平台期.结论 成功建立了改良的HBMSCs体外分离培养体系,且该方法培养的HBMSCs体外扩增速度、增殖能力、克隆形成能力明显改善.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李忠俊	第三军医大学新桥医院输血科	70	325	10.0	14.0
2	冉茜	第三军医大学新桥医院输血科	7	21	3.0	4.0
3	肖燕妮	第三军医大学新桥医院输血科	6	41	4.0	6.0
4	相丽欣	第三军医大学新桥医院输血科	4	14	3.0	3.0
5	叶兴德	第三军医大学新桥医院输血科	4	22	3.0	4.0
6	邓小军	第三军医大学新桥医院输血科	3	8	2.0	2.0