干旱胁迫的水稻根高效酵母双杂交体系建立

• 作者: Jeff Qingxi SHEN Linkun Gu Liyuan ZHANG 付坚 李定琴 王波 王玲仙 程在全 郭怡卿
• 来源期刊: 中国水稻科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 水稻根部 干旱胁迫 酵母双杂交文库 滤膜 高效杂交体系
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 198-202
• 页数: 5页
• 分类号: Q945.78|Q786
• 字数: 4981字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-7216.2013.02.013

摘要

采用SMART技术在酵母菌株AH109中构建了干旱胁迫下水稻根部全长cDNA文库,采用改进的滤膜杂交方法建立了高效酵母杂交体系,以抗旱相关水稻转录调控因子OsWRKy71基因作为诱饵对该方法进行检验.实验获得的酵母杂交文库容量为4.9×10 6,平均插入片段为800 bp,达到了基因分离和克隆等后续研究的标准.同时采用滤膜杂交法将文库的杂交效率提高到了6.9％,是液体杂交法的6倍以上.该方法不需要特殊的设备,且具有低消耗和高效率的特点,可用于高通量酵母双杂交分析.