四碘甲状腺原氨酸单克隆抗体的制备

• 作者: 刘迎春 卫君超 张文举 王权 石金磊 蒋蔚 邓志瑞 陈永军 高艺林
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 3,3′,5,5′-四碘甲状腺原氨酸 完全抗原 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 兽医科技
• 页码范围: 54-58
• 页数: 5页
• 分类号: S852.2
• 字数: 3820字
• 语种: 中文

摘要

采用碳二亚胺(EDC)法合成游离3,3',5,5'-四碘甲状腺原氨酸(FT4)的完全抗原FT4-BSA和FT4-OVA,将FT4-BSA作为免疫原,免疫BALB/c雌鼠,以FT4-OVA为包被原,利用EHSA方法确定抗FT4多克隆抗体的效价和敏感性.通过杂交瘤技术筛选出分泌抗T4单克隆抗体(T4 McAb)的杂交瘤细胞株,制备腹水单抗.经检测,腹水单抗效价是1∶9.0×104,以此建立的间接竞争EHSA方法,半数抑制质量浓度(IC50)是24.7 ng/mL;FT4单抗与游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)的交叉反应率是4.2％,与促甲状腺激素(TSH)无交叉反应;经抗体类型鉴定,获得的单抗重链属于IgG1亚类,轻链属于κ型.结果表明:本试验制备的单抗特异性强、敏感性高,能够为T4免疫学检测方法的建立和相关研究奠定良好基础.