烟草侧芽生长相关基因克隆及RNAi载体的构建转化

• 作者: 蔡刘体 郑少清 陈兴江
• 来源期刊: 烟草科技
• 学科: 农学
• 关键词: 侧芽 转化烟草 RNAi TLR基因
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 烟草农学
• 页码范围: 67-71,76
• 页数: 6页
• 分类号: S572.01
• 字数: 4199字
• 语种: 中文

摘要

为了培育打顶后不长侧芽的烟草植株,通过同源克隆,在烟草(品种K326)中得到了与侧芽生长相关基因的1个片断,将该片段序列通过BLAST检索Genbank同源比对,发现该基因同番茄的LS基因有非常高的同源序列,另外与水稻的MOC基因、拟南芥的LAS基因也有一定的同源性,命名为TLR基因.将TLR基因阅读框内640 bp的正向和反向片断构建到RNAi载体pHANNIBAL内含子两侧,再经NotI酶切回收约4300 bp目的片段,并插入到双元载体质粒pART27中,成功构建了含TLR基因片段正反向重复序列的植物表达载体pHANNIB AL-TLR-P ART27.将pHANNIB AL-TLR-P ART27质粒导入根癌农杆菌LBA4404中并转化烟草叶片细胞,没有得到转基因再生植株,推测这与TLR基因表达被抑制有关.