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摘要:
通过构建猪核转录因子C/EBPβ编码区真核表达体pEGFP-N1-C/EBPβ,将猪C/EBPβ异位表达于小鼠成肌细胞C2C12细胞中,为进一步研究C/EBPβ在猪脂肪发育中的调控机制奠定基础.本试验利用RT-PCR扩增C/EBPβ编码区序列并测序,提交GenBank;并将其克隆至真核表达载体pEGFP-N1,通过双酶切和测序鉴定重组质粒.将重组表达体pEGFP-N1-C/EBPβ导入C2C12细胞,荧光显微镜下观察C/EBPβ在细胞中的定位,半定量RT-PCR和Western blot检测C/EBPβ在细胞中的表达情况.本试验成功克隆测序了猪C/EBPβ基因编码区序列,并首次上传到GenBank;成功构建猪C/EBPβ真核表达体pEGFP-N1-C/EBPβ,并将其异位表达.结果表明:猪C/EBPβ在脂肪组织中表达量丰富,心肌和背最长肌表达微量,并且正确插入真核表达载体pEGFP-N1,荧光显微镜下观察重组体组主要集中在细胞核;而C/EBPβ基因和蛋白在转染重组体C2C12细胞中均有表达.本研究为提高猪肉肌内脂肪含量方面的研究提供新的思路.
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真核表达载体
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文献信息
篇名 猪核转录因子C/EBPβ真核表达载体的构建及表达
来源期刊 畜牧与兽医 学科 农学
关键词 C/EBPβ pEGFP-N1-C/EBPβ C2C12 表达
年,卷(期) 2013,(6) 所属期刊栏目 畜牧生产
研究方向 页码范围 36-39
页数 4页 分类号 S828
字数 3596字 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 苏玉虹 辽宁医学院畜牧兽医学院 112 408 10.0 14.0
2 朱弘焱 辽宁医学院畜牧兽医学院 25 46 3.0 5.0
3 陶晓莉 辽宁医学院畜牧兽医学院 3 2 1.0 1.0
4 吕利英 辽宁医学院畜牧兽医学院 2 0 0.0 0.0
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C/EBPβ
pEGFP-N1-C/EBPβ
C2C12
表达
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畜牧与兽医
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