野生型轧p53与JunB 融合基因对裸鼠肝细胞肝癌移植瘤生长抑制作用的实验研究

• 作者: 刘青光 姚英民 宋涛 张雷 杨雪 段建峰 郭成
• 来源期刊: 中华肝脏外科手术学电子杂志
• 关键词: 基因融合 转染 小鼠,近交BALB C 肿瘤移植
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 180-185
• 页数: 6页
• 字数: 3555字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3877/cma.j.issn.2095-3232.2013.03.010

摘要

目的 探讨野生型(wt)-p53 与JunB 融合基因对裸鼠肝细胞肝癌(肝癌)移植瘤的抑制作用.方法 分别应用携带绿色荧光蛋白(GFP) 的wt-p53 与JunB 融合基因质粒和脂质体Lipofectmine 2000 (融合基因载体)、携带GFP 的空质粒和Lipofectmine 2000 (空载体) 及单纯Lipofectmine 2000 转染HepG2 肝癌细胞.应用G418 筛选抗生素培养基筛选阳性克隆,应用逆转录聚合酶链反应进行阳性克隆鉴定.将18 只BALB/c 裸鼠按随机数字表法随机分为实验组、阴性对照组和空白对照组,每组6 只,分别取融合基因载体、空载体转染的HepG2 肝癌细胞及单纯的HepG2 肝癌细胞接种裸鼠,将2×107 个肿瘤细胞悬液皮下注射至裸鼠右侧背部,于注射后的28 d 处死荷瘤裸鼠,测量肿瘤体积和重量,计算肿瘤抑制率.3 组裸鼠的肿瘤体积和肿瘤重量比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t 检验.结果 融合基因载体和空载体转染HepG2 肝癌细胞24 h 后,转染效率均达到40豫.G418 筛选抗生素培养基筛选10 d,融合基因载体和空载体转染的HepG2 肝癌细胞出现较大的单细胞阳性克隆,扩大培养后获得稳定表达融合基因的HepG2 细胞.凝胶电泳显示融合基因载体转染的HepG2 肝癌细胞的p53 和JunB 基因表达量较空载体转染的肝癌细胞增高.融合基因载体转染的HepG2 肝癌细胞的p53 基因相对含量为6.09,JunB 为0.13;空载体转染的HepG2 肝癌细胞的p53 基因相对含量为0.42,JunB 为0.04.3 组裸鼠移植瘤位于背侧皮下,实验组裸鼠移植瘤较小,直径为数毫米,阴性对照组与空白对照组裸鼠移植瘤均明显隆起于裸鼠背部皮下,直径介于十数毫米与数十毫米之间,移植瘤均呈菜花样突出,表面光滑无包膜,与周围组织分界明显,触之质硬,与深部组织无明显粘连,腹腔各脏器表面光滑,未见有明显的转移灶.实验组与阴性对照组移植瘤的体积分别为(47±21)mm3和(384±166)mm3,两组差异有统计学意义(LSD-t=4.638,P<0.05);两者重量分别为(2.6±0.5)g 和(10.1±0.6)g,差异亦有统计学意义(LSD-t=19.560,P<0.05).实验组与空白对照组移植瘤的体积(292±103)mm3 比较,差异有统计学意义(LSD-t=5.740,P<0.05),实验组与空白对照组移植瘤的重量(9.6±0.7)g 比较,差异亦有统计学意义(LSD-t=27.225,P<0.05).实验组平均肿瘤抑制率为84%.结论 wt-p53 和JunB 融合基因可明显抑制裸鼠肝癌移植瘤的生长.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张雷	西安交通大学第一附属医院肝胆外科	55	423	10.0	19.0
2	郭成	西安交通大学第一附属医院肝胆外科	138	1533	21.0	29.0
3	姚英民	西安交通大学第一附属医院肝胆外科	71	616	12.0	21.0
4	刘青光	西安交通大学第一附属医院肝胆外科	155	1133	18.0	22.0
5	杨雪	西安交通大学第一附属医院肝胆外科	34	220	7.0	13.0
6	段建峰	西安交通大学第一附属医院肝胆外科	7	16	3.0	4.0
7	宋涛	西安交通大学第一附属医院肝胆外科	91	380	12.0	17.0