对虾桃拉综合征病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立

• 作者: 方成俊 杨奇志 潘迎芬 王碧生 陈俊玉 陈旭新 陈晖
• 来源期刊: 福建畜牧兽医
• 关键词: 桃拉综合征病毒 实时荧光定量PCR(FQ-PCR) 检测
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 页码范围: 16-19
• 字数: 446字
• 语种: 中文

摘要

目的:建立一种敏感、定量、快速、特异、安全的实时荧光定量PCR检测方法,用于对虾桃拉综合征病毒(TSV)的早期诊断和监测.方法:从GeneBank下载所有Taura病毒的序列,用生物软件进行序列比对,在TSV保守区序列设计特异性引物和探针.对实时荧光定量PCR反应条件进行优化,提高特异性和灵敏度.结果:检测灵敏度达450个病毒拷贝,超过普通PCR100倍;检测特异性为100%,高于普通PCR;检测时间在60 min内,约为普通PCR的1/4;有效解决PCR产物的气溶胶污染问题,安全性高.结论:本研究应用荧光定量PCR技术用于对虾桃拉综合征病毒检测具有敏感、定量、快速、特异、安全等优点.