抗人甲胎蛋白单链抗体融合蛋白的构建、表达及初步鉴定

• 作者: 冯丽亚 姬晓南 张瑜 高向东
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 医学
• 关键词: 甲胎蛋白 反转录聚合酶链式反应 抗体可变区 单链抗体 肠激酶 亲和层析
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 471-474
• 页数: 4页
• 分类号: R730.45|Q78
• 语种: 中文

摘要

甲胎蛋白(Alpha fetoprotein,AFP)是重要的肝癌诊断标记物,在肝癌的进展过程中扮演重要角色.构建具有免疫学活性的抗人AFP单链抗体,为进一步的研究奠定实验基础.采用RT-PCR技术,从分泌抗人AFP单克隆抗体的杂交瘤细胞中扩增mAb抗体可变区的VH、VL基因,并进一步将其组装成VH-Linker-VL型的ScFv片段.将ScFv片段亚克隆至质粒pET32a中,将重组质粒转染大肠杆菌BL21并IPTG诱导表达ScFv蛋白,利用肠激酶切除Trx标签后,经镍柱亲和层析获得蛋白,竞争抑制ELISA法初步鉴定活性,竞争抑制率达到54.13％.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张瑜		11	26	3.0	5.0
2	高向东		188	1604	21.0	30.0
3	姬晓南		4	6	1.0	2.0
4	冯丽亚		3	5	1.0	2.0