嗜水气单胞菌诱导中华绒螯蟹消减文库的构建及初步分析

• 作者: 吴小平 江坤 赵大显 陈敏文
• 来源期刊: 江西农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 中华绒螯蟹 嗜水气单胞菌 消减cDNA文库 表达序列标签
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 生物技术与工程
• 页码范围: 398-403
• 页数: 6页
• 分类号: S968.25
• 字数: 4597字
• 语种: 中文

摘要

利用抑制消减杂交(SSH)技术分离嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila诱导中华绒螫蟹(Eriocheir sinensis)差异表达的基因,以血淋巴细胞为材料,提取感染前后总RNA,经mRNA分离、cDNA合成、酶切、加接头后分别以感染组为检测子(tester)、对照组为驱动子(driver)进行正向抑制性消减杂交,以对照组为检测子、感染组为驱动子进行反向消减杂交,成功获得了中华绒螫蟹正反双向差异消减cDNA文库；对构建的文库进行菌落PCR鉴定发现,克隆中插入的片段主要分布在100-1 000 bp之间；随机选取54个阳性克隆测序,共获得37条有效表达序列标签(EST)序列,将测序结果提交到GenBank进行Blastn比对发现,6条与其他物种的免疫基因序列具有较高的同源性.上述结果表明,构建的文库质量较好,且差异表达的与抗病相关的基因得到了富集,为进一步开展中华绒螯蟹抗病重要功能基因的筛选、克隆和功能分析奠定了基础,为揭示中华绒螯蟹抗病的分子机理提供了理论依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴小平	南昌大学生命科学与食品工程学院	111	708	16.0	20.0
5	赵大显	南昌大学生命科学与食品工程学院	19	93	6.0	9.0
9	陈敏文	南昌大学生命科学与食品工程学院	1	2	1.0	1.0
10	江坤	南昌大学生命科学与食品工程学院	1	2	1.0	1.0