麻楝ISSR-PCR反应体系的建立及优化

• 作者: 仲崇禄 姜清彬 张勇 武冲 陈珍 陈羽
• 来源期刊: 浙江农林大学学报
• 关键词: 林木育种学 麻楝 ISSR PCR条件 优化
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 620-626
• 页数: 7页
• 分类号: S722.3
• 语种: 中文

摘要

模板DNA、引物、三磷酸碱基脱氧核苷酸(dNTPs),镁离子(Mg2+)浓度、Taq DNA聚合酶的用量以及退火温度是影响简单序列重复区间扩增-聚合酶链式反应(ISSR-PCR)的主要因素.以麻楝Chukrasia tabularis叶片基因组DNA为试验材料,系统地测试这6个因素对麻楝ISSR-PCR反应结果的影响.结果表明:最优的反应体系为20 μL反应体系中含30 ng模板DNA,1.00 μmol ·L-1随机引物,0.15 mmol·L-1dNTPs,2.50 mmol·L-1 Mg2+,2.50×16.67nkat Taq DNA聚合酶.最佳退火温度为56℃,ISSR-PCR反应程序为94℃预变性5.0 min,94℃变性45 s,56℃退火45 s,72℃延伸1.5 min,40个循环；72℃再延伸7.0 min,4℃保存.应用优化的ISSR-PCR反应体系对24份麻楝个体材料进行扩增,均能扩增出丰富稳定的条带.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	仲崇禄	中国林业科学研究院热带林业研究所	71	570	13.0	19.0
2	陈羽	中国林业科学研究院热带林业研究所	67	686	15.0	22.0
3	陈珍	中国林业科学研究院热带林业研究所	32	148	7.0	9.0
4	姜清彬	中国林业科学研究院热带林业研究所	30	170	8.0	11.0
5	张勇	中国林业科学研究院热带林业研究所	46	295	9.0	14.0
6	武冲	中国林业科学研究院热带林业研究所	6	64	5.0	6.0