慢病毒介导SOX9基因转染骨髓间充质细胞中的基因表达

• 作者: 卫小春 杨自权 梁大川 白洁玉 程鹏
• 来源期刊: 中国骨伤
• 关键词: 骨关节炎 细胞介导免疫 慢病毒属 SOX9基因 骨髓间充质细胞
• 年，卷（期）: 2013,（7）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 597-600
• 页数: 4页
• 字数: 3150字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-0034.2013.07.016

摘要

目的:构建携带小鼠SOX9基因的慢病毒载体,体外转染小鼠骨髓间充质细胞,观察小鼠SOX9基因在小鼠间充质细胞中的表达.方法:从含有小鼠SOX9基因的质粒提取总RNA,利用RT-PCR方法扩增目的基因.连接目的基因与经Age-Ⅰ酶切线性化的慢病毒载体,转化感受态的大肠杆菌对质粒进行扩增,筛出阳性转化子,经293T细胞包装,收集病毒后,通过基因测序和限制性核酸内切酶酶切的方法对质粒进行鉴定.Lenti-SOX9-EGFP体外转染小鼠骨髓间充质细胞,利用倒置荧光显微镜观察转染是否成功,并通过流式细胞仪测定转染效率.同时利用RT-PCR和Western Blot检测小鼠SOX9基因的表达.结果:成功构建了携带SOX9基因慢病毒载体,Lenti-SOX9-EGFP能高效转染小鼠骨髓间充质细胞.RT-PCR和Western Blot检测显示经SOX9基因转染的小鼠骨髓间充质细胞表达目的基因产物.结论:利用慢病毒介导SOX9基因成功地转染小鼠骨髓间充质细胞,而且SOX9基因在小鼠骨髓间充质细胞中得到表达,这为SOX9修复软骨损伤的进一步研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卫小春	山西医科大学第二医院骨科	256	1901	21.0	31.0
2	杨自权	山西医科大学第二医院骨科	59	337	10.0	13.0
3	白洁玉	山西医科大学第二医院骨科	8	37	4.0	6.0
4	程鹏	山西医科大学第二医院骨科	4	15	3.0	3.0
5	梁大川	山西医科大学第二医院骨科	8	34	4.0	5.0