样品前处理对大米及米制品转基因成分荧光PCR检测结果的影响

• 来源期刊: 检验检疫学刊
• 学科: 农学
• 关键词: 样品前处理 大米及米制品 转基因成分 荧光PCR检测
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 页数: 1页
• 分类号: S511
• 语种: 中文

摘要

[目的]通过分析样品前处理对大米及米制品转基因成分荧光PCR检测结果(Ct值)准确性的影响,建立优化的前处理方法.[方法]样品DNA提取采用CTAB法,设置3种样品颗粒细度与3种样品DNA提取温育时间的组合共9种处理,应用双因素方差分析的F检验分析处理间Ct值的差异显著性,根据t检验结果,筛选出DNA提取与荧光PCR检测效果最佳的前处理样品细度与CTAB温浴时间组合.[结果]F检验结果:在9种处理组合中,处理组合之间的大米及米制品DNA提取浓度都存在极显著差异;不同处理对大米内源基因GOS与外源CaMV 35S基因的Ct值影响极显著;对于米制品白粿干与米粉干,CTAB温浴时间对内源基因GOS与CaMV35S基因Ct值的影响达到显著或极显著水准,而样品颗粒大小仅对白粿干的CaMV 35S基因Ct值有显著影响,对米粉干的GOS与CaMV 35S基因及白粿干GOS的Ct值的影响都不显著.t检验结果表明最佳处理组合为:大米颗粒细度>100目,CTAB缓冲液温浴时间>8h;白粿干样品颗粒细度>50目,CTAB缓冲液浸泡温浴时间≥4h;米粉干颗粒细度>50目,CTAB缓冲液浸泡温浴时间>8h.