芽胞杆菌菌体蛋白提取方法的比较

• 作者: 刘波 尤民生 胡桂萍 贾宪波
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 芽胞杆菌 蛋白提取 破碎方法
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 698-701
• 页数: 4页
• 分类号: Q503
• 字数: 3485字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2013.05.024

摘要

目的：：比较不同破碎方法下3种芽胞杆菌菌体蛋白的提取效果。方法：以菊酯类农药降解菌巨大芽胞杆菌、球形芽胞杆菌、弯曲芽胞杆菌为研究对象，以裂解液为提取介质，分别采用超声波破碎法、水煮法和机械破碎法提取芽胞杆菌蛋白，并通过革兰染色电镜观察菌株破碎程度，用SDS-PAGE和Bradford法测定蛋白浓度。结果：革兰染色电镜观察发现玻璃珠机械破碎法对3种芽孢杆菌的细胞壁破碎程度最明显，其次为超声波破碎法，水煮法破碎效果不明显。SDS-PAGE和Bradford法测定结果表明，巨大芽胞杆菌、球形芽胞杆菌、弯曲芽胞杆菌经玻璃珠机械破碎后，提取的蛋白图谱条带清晰，丰度高，重复性好，含量分别为20.247、19.902和18.893 mg/mL；经超声波破碎提取的蛋白图谱条带较清晰，丰度一般，重复性不好，含量分别为10.572、9.438和10.424 mg/mL；经沸水浴破碎提取的蛋白图谱条带模糊，丰度低，重复性差，含量分别为1.366、1.119和1.136 mg/mL。结论：玻璃珠机械破碎法是破碎3种芽胞杆菌的最优方法，破碎后提取的蛋白含量高，条带清晰，重复性好。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘波	福建省农业科学院农业生物资源研究所	496	4446	29.0	44.0
2	尤民生	福建农林大学应用生态研究所	170	3382	30.0	48.0
3	胡桂萍	福建农林大学应用生态研究所	6	26	4.0	5.0
4	贾宪波	福建农林大学应用生态研究所	3	13	2.0	3.0