球等鞭金藻△5去饱和酶基因IgD5在拟南芥中的功能鉴定

• 作者: 亓宝秀 刘江 孙全喜 李新征
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 球等鞭金藻 △5去饱和酶 花生四烯酸 二十碳五烯酸 ω3脂肪酸 拟南芥
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 928-934
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1006.2013.00928

摘要

从球等鞭金藻中克隆到一个△5去饱和酶基因,命名为IgD5.系统发育树分析表明,该基因编码产物与来源于巴夫藻Pavlova salina的△5去饱和酶亲缘关系最近.此前通过酿酒酵母表达系统,证明IgD5对ω6脂肪酸具有△5去饱和酶活性,但并未鉴定IgD5对ω3脂肪酸的催化活性.我们将IgD5转化能够内源合成二高-γ-亚麻酸(DGLA,20∶3△8,11,14)和二十碳四烯酸(ETA,20∶4△8,11,14,17)的已携带2个基因的拟南芥(简称TMA2),通过PCR及RT-PCR筛选阳性植株,提取转基因阳性植株叶片总脂肪酸,用气相色谱分析法检测到花生四烯酸(AA,20∶4△5,8,11,14)和二十碳五烯酸(EPA,20∶5△5,8,11,14,17),含量分别达7.44％和2.07％,转化效率分别为68％和60％,证明IgD5在转基因植物中具有△5去饱和酶的活性,对ω3/ω6脂肪酸没有明显偏好性,并且催化活性远高于其在酵母中的活性.在转IgD5的TMA2中除了AA和EPA,没有检测到其他新脂肪酸,表明IgD5底物专一性很强,是一个可用于植物转基因替代生产鱼油的良好基因.