用COLD-PCR方法提高BCR-ABL1激酶区耐药突变检测灵敏度

• 作者: 刘红星 孙慧 张之芬 李元堂 李庆 武焕玲 王倩 田文君 陈永金
• 来源期刊: 中华检验医学杂志
• 关键词: 白血病,髓系,慢性,BCR-ABL阳性 融合蛋白质类,bcr-abl 蛋白酪氨酸激酶类 突变 聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 246-251
• 页数: 6页
• 字数: 4377字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2013.03.012

摘要

目的 探讨用低变性温度共扩增PCR(COLD-PCR)方法提高BCR-ABL1融合基因激酶区耐药突变检测灵敏度的可行性.方法 本研究为实验诊断研究.设计常规巢式PCR(CN-PCR)和COLD-PCR方案扩增BCR-ABL1激酶区全长,扩增产物纯化后用Sanger测序法检测激酶区突变(KDM).采集32例经伊马替尼(IM)治疗并出现耐药的慢性粒细胞性白血病(CML)患者和20例初诊CML患者外周血或骨髓标本,用上述2种方案检测标本中的KDM.用PCR扩增和基因克隆方法鉴定患者标本中KDM所占比例.制备含不同KDM比例的标准品,对比分析2种方法的检测灵敏度.结果 32例IM耐药患者中,共检出15种KDM.其中用CN-PCR方法检出23例(71.9％) KDM阳性,用COLD-PCR检出28例(87.5％) KDM阳性.在20例初诊CML患者中,用CN-PCR未检出KDM,用COLD-PCR方法检出1例有p.E459K突变,突变型基因比例为3.5％.对于16种不同类型的KDM,COLD-PCR方法可提高检测灵敏度4～12倍.结论 用COLD-PCR方法可有效提高BCR-ABL1激酶区耐药突变的检测灵敏度,有助于早期发现耐药突变.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘红星	北京市道培医院检验中心	19	118	7.0	10.0
2	王倩	山东大学附属省立医院检验科	106	675	14.0	21.0
3	孙慧	山东大学附属省立医院检验科	22	97	7.0	9.0
4	李庆	山东省淄博市第一医院检验科	14	37	3.0	6.0
5	张之芬	山东大学附属省立医院检验科	13	26	3.0	4.0
6	田文君	山东大学附属省立医院检验科	15	62	4.0	6.0
7	陈永金	山东大学附属省立医院检验科	3	9	2.0	3.0
8	李元堂	山东大学附属省立医院检验科	13	63	6.0	7.0
9	武焕玲	山东大学附属省立医院检验科	6	37	3.0	6.0