尿路致病性大肠杆菌ppk1基因缺失株的构建及其生物学特性研究

• 作者: 吴晓蔓 彭亮 潘嘉韵 罗苏
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 关键词: 尿路感染 大肠杆菌 基因敲除 聚磷酸盐激酶1
• 年，卷（期）: 2013,（7）
• 所属期刊栏目: 细菌学
• 页码范围: 531-536
• 页数: 6页
• 字数: 5227字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2013.07.010

摘要

目的构建尿路致病性大肠杆菌CFT073的聚磷酸盐激酶1（ polyphosphate kinase ， PPK1）基因敲除株，并初步探索其体外生物学特性。方法以CFT073株为研究对象，利用Red同源重组技术敲除CFT073的ppk1基因，构建敲除株△pk1；通过细胞实验即以人膀胱癌上皮细胞5637为体外模型对CFT073野生型菌株、敲除菌株的黏附及侵袭能力进行比较；采用96孔板结晶紫染色法分析CFT073 ppk1基因敲除对其生物膜形成能力的影响。结果成功构建了CFT073 ppk1基因敲除株；敲除ppk1后，细菌对膀胱癌上皮细胞的黏附、侵袭能力较野生株都明显减弱；△pk1在各时间点570 nm处结晶紫吸光度值均较野生株的低。结论利用Red同源重组技术可成功敲除CFT073的ppk1基因，ppk1在尿路致病性大肠杆菌黏附、侵袭尿路上皮及生物膜形成过程中可能发挥了重要作用。