Ⅱ型肺泡上皮细胞凋亡相关微小RNA的筛选

• 作者: 刘国跃 戢慧 李康 覃松 钱明江 陈淼
• 来源期刊: 中华危重病急救医学
• 关键词: 肺泡上皮细胞,Ⅱ型 凋亡 微小RNA 基因芯片
• 年，卷（期）: 2013,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 546-549
• 页数: 4页
• 字数: 3243字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-4352.2013.09.010

摘要

目的 利用基因组芯片筛选Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)凋亡相关微小RNA (microRNA,miRNA),以期为临床防治高氧性急性肺损伤(HALI)提供新策略.方法 原代培养雄性SD大鼠AECⅡ36 h,加入0.5 mmol/L H2O2诱导建立AECⅡ凋亡模型,透射电镜下鉴定AECⅡ并观察凋亡细胞形态；于制模前及制模后2.5、6、12、24 h收集细胞,流式细胞术检测细胞凋亡率；基因芯片技术筛选AECⅡ凋亡相关miRNA,并采用实时荧光聚合酶链反应(RT-PCR)对基因芯片结果进行验证.结果 透射电镜下观察可见特征性的微绒毛及嗜锇性板层小体,鉴定为AECⅡ.透射电镜下可见细胞质回缩,染色质凝聚、边聚,细胞表面微绒毛稀少,嗜锇性板层小体排空.H2O2损伤细胞后,细胞凋亡率较空白对照组显著增加,且随损伤时间延长而逐渐上升[制模前及制模后2.5、6、12、24 h分别为(9.43±1.02)％、(18.38±2.91)％、(28.57±1.18)％、(35.83±2.66)％、(57.68±2.22)％,两两比较P＜ 0.05].与制模前相比,制模24h细胞伴有多种miRNAs的差异表达,其中rno-miR-449a-5p、rno-miR-34b/c-5p、rno-miR-200a/c-3p、rno-miR-146a-5p、rno-miR-141-3p、rno-miR-21-5p、rno-miR-375-3p、rno-miR-29b-3p、rno-miR-214-5p、rno-miR-210-5p及rno-miR-214-3p与凋亡密切相关.RT-PCR结果验证凋亡相关miRNAs结果与芯片结果一致.结论 利用基因组芯片筛选AECⅡ凋亡相关miRNA,其中miR-34家族可能是AECⅡ凋亡调控的主要参与者.rno-miR-21-5p可能是AECⅡ内重要的抗凋亡基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈淼	遵义医学院附属医院重症医学科	49	250	10.0	14.0
2	钱明江	遵义医学院附属医院重症医学科	11	108	6.0	10.0
3	戢慧	遵义医学院附属医院重症医学科	5	42	3.0	5.0
4	李康	遵义医学院附属医院重症医学科	10	42	4.0	6.0
5	刘国跃	遵义医学院附属医院重症医学科	12	75	5.0	8.0
6	覃松	遵义医学院附属医院重症医学科	10	58	4.0	7.0