中国人膀胱癌BIU-87细胞导向肽的体外筛选与特异性鉴定

• 作者: 凡振伟 张帆 徐磊 杨晓峰 王玮
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 噬菌体展示环七肽库 膀胱癌 BIU-87细胞 差减筛选 小分子荧光探针 导向肽
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 研究快报
• 页码范围: 515-521
• 分类号: R737.14|R730.51
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2013.05.002

摘要

目的:体外差减筛选噬菌体展示环七肽库,获得与中国人膀胱癌BIU-87细胞系高度结合的小分子多肽并鉴定其结合特异性.方法:以中国人膀胱癌BIU-87细胞作为靶细胞,正常人膀胱上皮细胞为吸附细胞,对噬菌体展示环七肽库进行3轮体外差减筛选.ELISA法鉴定与BIU-87细胞呈强阳性结合的噬菌体克隆,对其编码的DNA进行序列测定和同源性分析.化学合成与BIU-87细胞强阳性结合的肽段并制备成FITC标记的荧光探针,流式细胞术、荧光显微镜下鉴定其与BIU-87细胞、正常人膀胱上皮细胞、人前列腺癌PC3M细胞、人肝癌SMMC-7721细胞以及人结肠癌HCT116细胞的特异结合能力.结果:经3轮差减筛选将噬菌体展示环七肽库富集了25倍,阳性率达76％.共获得10个强阳性克隆,DNA共有序列为SISS-LTH、MARYMSA、TVRTSAD.BIU-87细胞与小分子荧光探针FITC-SISSLTH的结合率为(80.06±8.78)％,显著高于FITC-MARYMSA的(52.93±7.28)％、FITC-TVRTSAD的(38.04±7.47％)、FITC-EDRKETA的(1.91±1.37)％和FITC的(9.85±2.9)％(均P＜0.01).FITC-SISSLTH与BIU-87细胞的结合率显著高于与正常人膀胱上皮细胞、人前列腺癌PC3M细胞、人肝癌SMMC-7721细胞和结肠癌HCT116细胞的结合率[(80.06 ±8.78)％ vs (13.89±1.97)％,(8.13±2.85)％,(27.00±2.87)％,(2.33±1.75)％；均P＜0.01].结论:噬菌体展示环七肽库经3轮体外差减筛选获得高效结合BIU-87细胞的导向肽SISSLTH,具有良好的结合特异性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨晓峰	山西医科大学第一附属医院泌尿外科	89	226	7.0	9.0
2	张帆	山西医科大学免疫学研究中心	54	157	6.0	10.0
3	徐磊	山西医科大学研究生院	3	8	2.0	2.0
4	王玮	山西医科大学研究生院	14	44	5.0	6.0
5	凡振伟	山西医科大学研究生院	2	27	2.0	2.0