猪日本乙型脑炎病毒NS5原核表达和多克隆抗体制备

• 作者: 余风艳 张保新 沈红霞 王晓杜 赵凡凡 韩秀杰
• 来源期刊: 《福建农林大学学报（自然科学版）》
• 关键词: 日本乙型脑炎病毒 非结构蛋白NS5 原核表达 纯化
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 307-310
• 页数: 4页
• 分类号: S855.3
• 语种: 中文

摘要

提取猪日本乙型脑炎病毒(JEV)上海分离株的基因组RNA,反转录合成cDNA,扩增JEV-NS5基因片段,亚克隆到原核表达载体pET-28(a)上,构建重组原核表达质粒pET-28 (a)-JEV-NS5,转化大肠埃希氏菌 BL21(DE3)菌株,IPTG诱导表达重组JEV-NS5蛋白,获得分子质量为103 ku的重组蛋白.该蛋白主要以包涵体形式表达,表达量占总菌体蛋白的35％以上,His-band Ni+纯化后,获得高纯度重组蛋白占总蛋白的比例达75％以上.以纯化的蛋白免疫小鼠,制备小鼠抗JEV-NS5抗体,抗体效价达到3×104,并能与病毒感染的样本反应,证明该蛋白具有较好的特异性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王晓杜	浙江农林大学动物科技学院	20	68	4.0	7.0
2	沈红霞	浙江农林大学动物科技学院	3	5	1.0	2.0
3	韩秀杰	浙江农林大学动物科技学院	4	8	2.0	2.0
4	赵凡凡	浙江农林大学动物科技学院	6	16	3.0	3.0
5	张保新	浙江农林大学动物科技学院	4	9	2.0	2.0
6	余风艳	浙江农林大学动物科技学院	3	5	1.0	2.0