水稻蛋白二硫键异构酶基因沉默载体构建及其转基因后代的高温结实特性分析

• 作者: 刘光快 张春娇 曹珍珍 潘刚 程方民 苏达 韦克苏
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 水稻 蛋白二硫键异构酶 基因沉默 RNAi载体构建 高温胁迫 结实特性
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源·分子遗传学
• 页码范围: 816-826
• 页数: 11页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1006.2013.00816

摘要

采用RT-PCR法亚克隆了PDI基因保守区内450 bp的靶标序列作为干扰区段,构建了含有内含子hpRNA(ihpRNA)的双元表达载体pTCK303-RiOsPDI,经农杆菌介导转化日本晴,获得转基因植株；通过在T0代对其潮霉素(Hyg)抗性基因的PCR鉴定,确定携带有干扰片段的T-DNA区已整合到水稻基因组中,且在转基因T1代符合3:1的分离模式.半定量PCR和荧光定量PCR的检测结果表明,PDI基因沉默转基因阳性植株不同器官中的PDI表达量均显著降低,尤其是其籽粒中表达量较微,几乎能引起靶基因80％左右沉默.对转基因T2代植株的高温结实特性和籽粒理化品质的检测结果,PDI基因沉默会引起高温胁迫处理下结实率的大幅度降低,耐热性显著下降,但其在常温处理下的结实率与对照之间无显著差异.此外,PDI基因沉默后,稻米的透明度下降、垩白度增加,但对籽粒粗蛋白总量和直链淀粉含量的影响不甚明显.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	苏达	浙江大学农业与生物技术学院	10	255	7.0	10.0
2	程方民	浙江大学农业与生物技术学院	64	2304	22.0	47.0
3	潘刚	浙江大学农业与生物技术学院	34	286	10.0	15.0
4	刘光快	浙江大学农业与生物技术学院	2	41	2.0	2.0
5	曹珍珍	浙江大学农业与生物技术学院	5	95	5.0	5.0
6	韦克苏	浙江大学农业与生物技术学院	6	103	6.0	6.0
7	张春娇	浙江大学农业与生物技术学院	2	22	2.0	2.0