HPLC-ESI-MS法测定大鼠脑组织中神经递质L/D-丝氨酸的含量

• 作者: 刘莎 张耀 段雅乐 王伟莉 赵政
• 来源期刊: 华东师范大学学报（自然科学版）
• 学科: 化学
• 关键词: 高效液相色谱—电喷雾离子化—质谱 脑组织 神经递质 D-丝氨酸 L-丝氨酸
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 165-170
• 页数: 6页
• 分类号: O657.63
• 字数: 3192字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-5641.2013.06.020

摘要

建立一种检测大鼠脑组织中L-丝氨酸和D-丝氨酸的高效液相色谱—电喷雾离子化—质谱联用技术(HPLC-ESI-MS)的测定方法.大鼠脑组织样品匀浆及离心后,取上清液并加入Marfey试剂对样品中L/D-丝氨酸进行衍生化.HPLC流动相为甲酸铵和乙腈,梯度洗脱;质谱采用电喷雾离子源,在负离子模式下进行定性定量分析.结果显示,L-丝氨酸和D-丝氨酸在22 min内得以分离,在2.5～500 ng/mg和1.2～250 ng/mg浓度范围内分别与各自的色谱峰面积呈良好线性关系;L/D-丝氨酸的最低定量限分别为2.5 ng/mg和1.2 ng/mg,方法回收率均在81％～89％％范围内.本法具有省时快速,灵敏度和选择性高等优点.将此法运用于成年和老年大鼠海马及皮层中L-丝氨酸和D-丝氨酸含量测定,结果表明,与成年鼠相比,老年鼠海马和皮层中L-丝氨酸的含量基本不变,而D-丝氨酸含量则明显减少,提示D-丝氨酸的变化与正常的衰老过程密切相关.