NOD8对LPS诱导巨噬细胞释放NO、TNF-α和IL-1β的影响

• 作者: 田莉 胡巢凤 郑媛媛 颜亮
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RAW264.7细胞 脂多糖类 NOD8蛋白 核因子κB 一氧化氮 白细胞介素1β
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 889-894
• 页数: 6页
• 分类号: R329.21
• 字数: 4668字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2013.05.021

摘要

目的:探讨NOD8对脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞释放一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)的影响.方法:pEGFP-C2及pEGFP-NOD8重组质粒分别转染小鼠巨噬细胞RAW264.7,以LPS刺激RAW264.7细胞0、6、12、24h后,采用Griess reagent法测定观察细胞分泌的NO水平；ELISA法检测IL-1β和TNF-α的含量；荧光法测定活化的caspase-1水平；Western blotting检测NOD8蛋白表达及NF-κB p65亚基的核转位情况.结果:(1)与转染pEGFP-C2空质粒组比较,转染pEGFP-NOD8质粒组NOD8蛋白表达明显增加.(2)LPS刺激6、12、24h后,RAW264.7细胞释放NO、IL-1β及TNF-α均明显增加；而在pEGFP-NOD8+LPS组RAW264.7细胞,NO于12、24h的释放显著降低,IL-1β于6、12、24h的释放也明显降低,TNF-α的释放则无明显变化.(3)在LPS刺激6、12、24h后,RAW264.7细胞caspase-1活化水平均明显升高,胞浆NF-κB p65亚基表达明显减少,表明p65核转位增加；而pEGFP-NOD8+ LPS组可显著抑制caspase-1的活化以及NF-κB p65亚基的核转位,差异有统计学意义.结论:NOD8可抑制LPS诱导的巨噬细胞NO与IL-1β释放,其作用机制可能与NOD8抑制caspase-1及NF-κB的活化有关.