新型亲水聚合物修饰硅胶颗粒固定化酶的制备及在蛋白质组鉴定中的应用

• 作者: 宋子凤 秦伟捷 范超 蔡耘 钱小红
• 来源期刊: 色谱
• 学科: 化学
• 关键词: 固定化酶 蛋白质组学 原子转移自由基聚合反应
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 423-428
• 页数: 6页
• 分类号: O658
• 字数: 4489字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1123.2013.01007

摘要

采用原子转移自由基聚合法制备了亲水聚合物修饰的硅胶颗粒作为一种新型固定化酶载体,在实现胰蛋白酶高密度固定的同时,显著降低了载体材料非特异性吸附导致的样品损失.因此,该固定化酶材料兼具高酶解效率和高回收率的特性.以标准蛋白质牛血清白蛋白(BSA)为样本,使用该固定化酶1 mm即可完成酶解,鉴定到肽段对BSA的氨基酸序列覆盖率可达90％以上.该固定化酶材料成功应用于酵母菌全蛋白质复杂样本的酶解,从3 min酶解产物中鉴定到666个蛋白质,超过同样条件下溶液酶解12 h的鉴定结果.