Roscovitine同期化供核细胞对猴—猪异种核移植胚胎发育的影响

• 作者: 崔静辉 左二伟 梁明明 秦祖兴 罗军 罗茜 胡林林 许常龙 许惠艳
• 来源期刊: 南方农业学报
• 关键词: 猪 食蟹猴 异种核移植 细胞周期 同期化 胚胎发育
• 年，卷（期）: 2013,（10）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医·水产·蚕桑
• 页码范围: 1722-1726
• 页数: 5页
• 分类号: Q813.6
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2013.10.1722

摘要

[目的]探讨Roscovitine同期化供核细胞对食蟹猴—猪异种体细胞核移植胚胎体外发育的影响,为提高灵长类的核移植效率奠定基础.[方法]活体采集4岁雄性食蟹猴的耳组织,经组织块培养获得纯化的食蟹猴耳成纤维细胞,细胞经固定、染色后用流式细胞仪分析细胞周期分布.以不同同期化方法处理的食蟹猴耳纤维细胞为供体细胞,以体外成熟、去核的猪卵母细胞为受体细胞,利用电融合法构建食蟹猴—猪异种核移植胚胎,观察异种核移植重构胚胎的体外发育情况.[结果]以15 μmol/L Roscovitine处理食蟹猴耳成纤维细胞24、48、72 h获得的G0/G1期细胞比率分别为76.51％、89.69％和90.49％,其中处理48和72h的G0/G1期细胞比率显著高于对照组(P＜0.05).血清饥饿、接触抑制72 h同期化获得的G0/G1期细胞比率分别为91.12％和90.46％.Roscovitine同期化处理食蟹猴耳成纤维细胞48 h可有效提高食蟹猴—猪异种核移植重构胚胎的囊胚形成率(15.05％),显著高于血清饥饿同期化处理和接触抑制同期化处理的效果(P＜0.05).[结论]Roscovitine可有效同期化食蟹猴耳成纤维细胞在G0/G1期,最终提高食蟹猴—猪异种核移植重构胚胎的囊胚形成率.