鸡传染性支气管炎病毒Real-time RT-PCR检测方法的建立及应用

• 作者: 刘凤华 周双海 杨莹 王园 王鹏 路红 高峰
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡传染性支气管炎病毒 Real-time RT-PCR 定量检测
• 年，卷（期）: 2013,（8）
• 所属期刊栏目: 兽医—应用研究
• 页码范围: 45-49
• 页数: 5页
• 分类号: S855.3
• 字数: 4656字
• 语种: 中文

摘要

为定量检测鸡传染性支气管炎病毒(IBV)载量,建立IBV的Real-time RT-PCR方法.用RT-PCR方法扩增出IBV的N基因片段,并克隆到pEASY-T3载体中,构建成含有N基因片段的重组质粒.应用该重组质粒进行SYBR Green I Real-time PCR,建立了定量检测IBV核酸的标准曲线与直线回归方程,该方法显示:特异性强,检测下限至少达到5.58× 102拷贝/μL,其重复性试验的变异系数小于3.2％；用建立的方法对实验接种IBV M41株的雏鸡组织中的病毒核酸进行了定量检测,检测结果显示:攻毒后肾脏中IBV含量高于支气管和肺脏,支气管和肺脏中病毒含量在攻毒后第3天高于攻毒后第7、10天,并证实临床表现与病毒载量之间存在密切关系.研究结果表明,建立的Real-time RT-PCR检测方法特异性强、灵敏度高、可重复性好,可用于IBV的定量检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘凤华	北京农学院动物科学技术学院	102	1154	19.0	29.0
2	高峰	北京农学院动物科学技术学院	7	29	3.0	5.0
3	周双海	北京农学院动物科学技术学院	59	192	8.0	10.0
4	王园	北京农学院动物科学技术学院	3	11	2.0	3.0
5	王鹏	北京农学院动物科学技术学院	2	19	2.0	2.0
6	杨莹	北京农学院动物科学技术学院	1	9	1.0	1.0
7	路红	北京农学院动物科学技术学院	1	9	1.0	1.0