短发夹RNA沉默Tim-3分子表达对哮喘小鼠外周血Th1和Th17细胞的影响

• 作者: 徐佳莉 王莹 董宗祈 陆小霞 陈鹏
• 来源期刊: 中国当代儿科杂志
• 关键词: 哮喘 Tim-3 RNA沉默 T细胞 小鼠
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 论著·实验研究
• 页码范围: 302-307
• 语种: 中文
• DOI: 10.7499/j.issn.1008-8830.2013.04.014

摘要

目的 建立小鼠支气管哮喘模型,采用T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3(Tim-3)特异短发夹RNA(shRNA)沉默外周血单个核细胞(PBMCs)中Tim-3的表达,探讨Tim-3对辅助性T细胞1(Th1)和Th17细胞分化的影响.方法 用卵白蛋白(OVA)致敏并激发建立哮喘小鼠模型,分离哮喘小鼠PBMCs,用Tim-3特异的shRNA片段沉默哮喘小鼠PBMCs中高表达的Tim-3基因.Real-time PCR和Western blot检测Tim-3的表达,流式细胞分析技术(FACS)检测Th1和Th17的比例；ELISA检测细胞培养上清液中干扰素-γ(IFN-γ),白介素-4(IL-4),和白介素-17 (IL-17)的水平.结果 哮喘组小鼠PBMCs中Tim-3 mRNA表达明显升高；使用特异Tim-3 shRNA沉默哮喘小鼠PBMCs后,沉默组PBMCs中Th1细胞比例显著升高,Th17细胞比例显著下降,与阴性对照组相比差异有统计学意义(P＜0.01)；沉默组PBMCs培养上清液中IFN-γ明显升高,IL-17明显降低,与阴性对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05),IL-4水平无明显变化.结论 特异Tim-3 shRNA有效地沉默了Tim-3的表达,Tim-3表达的改变影响了T细胞的分化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董宗祈	武汉市儿童医院呼吸内科	61	1535	15.0	38.0
2	陆小霞	武汉市儿童医院呼吸内科	15	156	7.0	12.0
3	王莹	武汉市儿童医院呼吸内科	13	155	8.0	12.0
4	陈鹏	武汉市儿童医院呼吸内科	6	48	4.0	6.0
5	徐佳莉	武汉市儿童医院呼吸内科	2	5	1.0	2.0