石蒜黄烷酮3-羟化酶基因LrF3H的克隆及表达分析

• 作者: 姜小凤 朱玉球 童再康 高燕会 黄春红
• 来源期刊: 园艺学报
• 学科: 农学
• 关键词: 石蒜 黄烷酮3-羟化酶 基因克隆 表达
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 960-970
• 分类号: S682.2
• 语种: 中文

摘要

采用RT-PCR和RACE技术相结合的方法,从石蒜花瓣中克隆到1个黄烷酮3-羟化酶(F3H)基因的cDNA全长序列,全长1 293 bp,包含1 098 bp的完整开放阅读框,编码365个氨基酸；氨基酸序列比对显示该序列编码的氨基酸与水仙的F3H具有高达91％的同源性,将其命名为LrF3H.二级结构预测表明,随机卷曲是LrF3H蛋白最大量的结构元件,而α-螺旋和延伸链散布于整个蛋白中.保守结构域预测表明该基因编码的蛋白具有典型的F3H蛋白功能结构域,其保守结构域中含有铁离子及2-O-酮戊二酸结合位点,属于2OG-Fe Ⅱ_Oxy双加氧酶超家族.实时荧光定量PCR分析表明,LrF3H在整个花发育过程中均表达,而且从初蕾期到盛开期随着花瓣着色加深表达量逐渐增加,盛开期表达量最高,之后随着花朵萎蔫表达量下降；在不同器官中,LrF3H的表达量在花瓣和花葶中最高,而在根、鳞茎和叶片中都很低,推测该基因在石蒜花色形成过程中起着关键作用.