小鼠肾小管上皮细胞的原代培养及生物学特性

• 作者: 唐辛 徐进 李温斌 白蓉 许秀芳
• 来源期刊: 新乡医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 肾小管上皮细胞 原代培养 生物学特性 小鼠
• 年，卷（期）: 2013,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 593-597
• 分类号: R692.6
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨适用于小鼠肾小管上皮细胞(mRTECs)分离培养及鉴定的技术方法.方法 采用机械研磨肾脏组织分离肾小管节段并结合Ⅱ型胶原酶消化分离培养法进行mRTECs原代培养,利用倒置显微镜观察细胞生长情况；锥虫蓝法、绘制生长曲线法、3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法、DNA周期检测法分别测定和观察mRTECs传代成活率、生长情况及增殖特征；免疫荧光染色法鉴定细胞.结果 获得的细胞3d后从贴壁的肾小管节段边缘长出,7d后呈铺路石样,生长迅速可传代；传代细胞成活率达96％以上；第1代(P1)、第3代(P3)细胞生长曲线近似“S”形,MTT法显示P1、P3细胞生长至第3～5天光密度值变化较明显；随传代次数的增加,第5代细胞生长曲线近似平缓,光密度值无明显变化,细胞逐渐衰老；P1细胞G0/G1和(S +G2)/M分别为78.9％和21.1％,P3细胞G0/G1和(S+ G2)/M分别为82.1％和17.9％；P3细胞行免疫荧光染色细胞角质蛋白-18及上皮型钙黏素显示细胞质内蛋白表达阳性,细胞阳性率均达98％.结论 机械研磨并结合Ⅱ型胶原酶消化培养法能成功培养mRTECs,建立稳定、高效的细胞分离和培养技术方法,为肾脏疾病与心血管功能相关性研究提供理想的细胞来源.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李温斌	首都医科大学附属北京安贞医院北京市心肺血管疾病研究所心外科	32	185	7.0	12.0
2	许秀芳	首都医科大学附属北京安贞医院北京市心肺血管疾病研究所分子生物学研究室	9	67	5.0	8.0
3	徐进	北京卫生职业学院医学基础教研室	8	21	3.0	4.0
4	白蓉	北京卫生职业学院医学基础教研室	3	6	1.0	2.0
5	唐辛	北京卫生职业学院医学基础教研室	1	5	1.0	1.0