重组TNF-α衍生物RMPT的制备及其抗肿瘤作用初步研究

• 作者: 叶祖禄 徐文娜 洪岸 罗天杰 饶磊 马义
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 医学
• 关键词: TNF-α衍生多肽 基因重组 表达优化 抗肿瘤作用
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 21-25
• 页数: 5页
• 分类号: Q516|R979.1
• 语种: 中文

摘要

利用基因重组技术制备具有抗肿瘤作用的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)衍生多肽RMPT,并研究其体外生物学效应.PCR方法合成RMPT基因序列,定向插入高效表达载体pTXBl-MCS,在大肠杆菌ER2566中诱导表达重组融合蛋白并建立RMPT融合蛋白诱导表达的优化体系.N端自动切割、纯化、HPLC制备获得RMPT,电泳和质谱鉴定其分子质量.CCK-8检测RMPT对肿瘤细胞的抑制作用.实验结果表明:重组工程菌可溶性RMPT融合蛋白最佳诱导表达条件为37℃、8h、IPTG浓度0.75 mmol/L;DTT诱导蛋白内含肽自剪切固相纯化和HPLC制备重组肽RMPT,纯度大于95％,电泳和质谱鉴定其分子质量为3.7 ku,结果与理论值相符合,其产率为10.8 mg/L发酵液；体外研究表明,RMPT能够高效抑制多数肿瘤细胞增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	洪岸		107	856	14.0	25.0
2	马义		38	182	8.0	11.0
3	饶磊		3	0	0.0	0.0
4	罗天杰		4	0	0.0	0.0
5	叶祖禄		3	0	0.0	0.0
6	徐文娜		3	0	0.0	0.0