逆转录环介导等温扩增技术检测HIV-1方法的建立及颜色判定法的改良

• 作者: 丁雄 曾亚岚 王佶 石磊 聂凯 马学军
• 来源期刊: 中华预防医学杂志
• 关键词: 核酸扩增技术 HIV-1 萘酚类 恒温实时荧光
• 年，卷（期）: 2013,（11）
• 所属期刊栏目: 检验技术
• 页码范围: 1045-1049
• 页数: 5页
• 字数: 4634字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-9624.2013.11.016

摘要

目的 基于逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)技术建立可用于现场检测HIV-1的方法.方法 构建实时荧光检测法时,先测试其特异性和灵敏度,并对其定量检测进行探索,然后用35份HIV-1阳性样本对该方法进行评定；在颜色判定法上,先对羟基萘酚蓝(HNB)进行改良,并验证其实际显色效果,然后选取效果明显的样本进行显色灵敏度测试和35份阳性样本显色评定.结果 实时荧光法对HIV-1有很好的检测特异性,灵敏度可达每反应管10 ～ 100拷贝数RNA.该方法对所有阳性临床样本均100％ (35/35)检出,无一漏检,但其定量检测只局限于不低于每反应管103拷贝数.通过改良得到3种易分辨的HNB改良型显色剂,显色灵敏度等同于琼脂糖凝胶电泳级别,对35份HIV-1阳性样本的显色判定也无一漏检.结论 基于RT-LAMP技术的现场实时荧光法和改良型颜色判定法可以为真正实现现场快速、准确和灵敏检测HIV-1提供帮助.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	石磊	华南理工大学轻工与食品学院	99	786	17.0	22.0
2	马学军	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所	40	227	8.0	14.0
3	聂凯	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所	11	19	3.0	4.0
4	丁雄	华南理工大学轻工与食品学院	2	22	2.0	2.0
5	王佶	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所	9	11	2.0	3.0
6	曾亚岚	华南理工大学轻工与食品学院	3	6	2.0	2.0