中华眼镜蛇毒对K562/ADM和难治性急性髓性白血病细胞作用研究

• 作者: 凌伟 吴穗晶 李扬秋 杜欣 林伟 沈伟哉 翁建宇 郭荣 钟立业
• 来源期刊: 新医学
• 关键词: 中华眼镜蛇毒 白血病 K562/ADM细胞 细胞周期蛋白D
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究论著
• 页码范围: 68-72
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/g.issn.0253-9802.2013.01.021

摘要

目的:探讨中华眼镜蛇毒(NNAV)对人红白血病/阿霉素细胞(K562/ADM细胞)及原代难治性急性髓性白血病细胞的作用.方法:以K562/ADM细胞及10例急性髓性白血病(AML)患者的原代初发难治性急性髓性白血病细胞为研究对象进行实验,应用不同剂量的NNAV作用于细胞后,采用噻唑蓝实验法(MTT)测定细胞增殖情况,免疫细胞化学法检测凋亡相关蛋白Bcl2表达,流式细胞仪测定凋亡率,蛋白质印迹法检测Caspase-3表达.流式细胞仪检测NNAV对细胞周期的影响,检测原代初发难治性急性髓性白血病细胞细胞周期蛋白D(Cyclin-D)的表达情况；观察以上指标在Cyclin-D阳性表达组和阴性表达组有无差异.结果:经过不同浓度的NNAV处理后,无论是K562/ADM细胞还是初发难治性急性髓性白血病细胞,Bcl-2表达下调,Caspase-3表达上调；细胞增殖抑制明显,并具有时间依赖性及剂量依赖性.流式细胞仪检测证实0.8 mg/L和1.0 mg/L的NNAV均能够使原代初发难治性细胞阻滞于细胞周期的G0/G1期,而处于G2/M期的细胞含量减少.10例原发难治性急性髓性白血病细胞中Cyclin-D表达阳性7例,Cyclin-D表达阴性3例,但以上指标在Cyclin-D阳性表达组和阴性表达组无显著差异.结论:NNAV在体外可明显抑制K562/ADM细胞和原代初发难治性AML细胞增殖；调节细胞周期停滞于G0/G1期,减少G2/M期的细胞含量,提示NNAV有可能通过干预Bcl-2、Caspase-3表达而诱导细胞凋亡,细胞周期进程可能是中华眼镜蛇毒组分对原发难治性AML细胞的发挥增殖抑制作用的机制.