兔病毒性出血症病毒抗体间接ELISA检测方法的建立

• 作者: 王佳 王兴龙 邱立 郝华芳 陈胜利
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 兔病毒性出血症 重组VP60蛋白 ELISA
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 29-33
• 页数: 5页
• 分类号: S855.3
• 字数: 4015字
• 语种: 中文

摘要

建立一种检测兔病毒性出血症病毒(RHDV)抗体的间接ELISA方法.对RHDV陕西分离株VP60基因进行原核表达,Western blot分析表达产物的免疫反应性；以纯化的蛋白为包被抗原建立ELISA方法,并对反应条件进行优化.结果表明,VP60蛋白在大肠杆菌中成功表达,产物约为42.34 ku的融合蛋白,具有良好的反应原性；优化的ELISA最佳工作条件为:重组抗原包被浓度2.9μg/mL,37 ℃ 2h后4℃过夜,1％BSA 37℃封闭2h,待检血清37℃孵育1h,酶标抗体1∶10000稀释,37 ℃作用1h,37℃显色5 min,临界值为0.340；建立的ELISA方法特异性强、重复性好、敏感性高；临床检测180份样品,与血凝抑制试验的符合率为74.1％,与商品化试剂盒检测结果符合率为94.8％.该方法可用于临床样品的大批量检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邱立	西北农林科技大学动物医学院	12	78	5.0	8.0
2	王佳	西北农林科技大学动物医学院	19	180	7.0	13.0
3	王兴龙	西北农林科技大学动物医学院	25	40	3.0	5.0
4	郝华芳	西北农林科技大学动物医学院	9	28	3.0	4.0
5	陈胜利	西北农林科技大学动物医学院	3	4	1.0	2.0