环孢菌素A抑制大鼠胰岛素分泌的体外实验研究

• 作者: 丁群 刘倩 孙富军 孙茜 孟树优 张达 李代清 汤云昭
• 来源期刊: 中华内分泌代谢杂志
• 关键词: 环孢菌素A 两相胰岛素分泌 胰岛β细胞凋亡 P糖蛋白
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 339-343
• 页数: 5页
• 字数: 5220字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1000-6699.2013.04.019

摘要

目的 探索环孢菌素A抑制胰岛素分泌的分子机制 方法 经胆管不离体灌注胶原酶消化分离Wistar大鼠胰岛,环孢菌素A(0.5、1.0、2.5、5.0、10.0 μg/ml)干预不同时间后,吖啶橙/碘化丙锭染色,未经环孢菌素A处理的胰岛作为对照组,荧光显微镜下观察腆岛细胞存活变化.对照组和1.0 μg/ml环孢菌素A干预组中的胰岛分别孵育24 h后,进行高糖刺激胰岛素分泌实验;通过实时定量PCR方法探测P糖蛋白基因(abcb1b)、凋亡基因(casp3、Bcl-2)、胰岛素合成相关基因(pdx1、ins1、ins2)和胰高血糖素基因(glucagon)表达量的变化;通过罗丹明细胞内聚集实验评估P糖蛋白外排泵功能.结果 通过胰岛存活状态的观察,确定1.0 μg/ml环孢菌素A为合适的干预浓度.环孢菌素A 干预对体外胰岛高糖刺激下的第一时相分泌无抑制,而对第二时相抑制作用显著(P＜0.01) 环孢菌素A干预24 h后,abcb1b、ins1、ins2、pdx1、glucagon、casp3表达量均无变化;Bcl-2基因较对照组下调明显(P＜0.01)；环孢菌素A干预24 b后胰岛细胞内罗丹明聚集量的显著增加(P＜0.01) 结论 环孢菌索A 干预抑制胰岛素第二相分泌,凋亡基因Bcl-2表达的变化是关键因素之一.胰岛素分泌的变化与P糖蛋白的表达、胰岛素合成及胰高血糖素无关,但是环孢菌素A对P糖蛋白功能的影响非常显著,不能排除P糖蛋白调节胰岛素分泌的可能性.