靶向B7-H3基因RNA干扰慢病毒的构建及人胰腺癌PaTu8988稳定感染细胞株的建立

• 作者: 干文娟 张光波 张子祥 朱东明 李德春 李智 赵华 赵鑫
• 来源期刊: 中华胰腺病杂志
• 关键词: 胰腺肿瘤 B7-H3 RNA干扰 慢病毒感染
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 110-113
• 页数: 4页
• 字数: 2951字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1674-1935.2013.02.009

摘要

目的 构建靶向人B7同源性3(B7-H3)基因的小发夹RNA(shRNA)的慢病毒载体,并建立稳定感染的胰腺癌PaTu8988细胞株.方法 根据GenBank提供的B7-H3 cDNA序列,设计4条靶向B7-H3的siRNA序列,构建重组干扰质粒pGCSIL-GFP-B7-H3-shRNA.将重组干扰质粒和过表达B7-H3质粒共同转染293T细胞,经蛋白质印迹法筛选出干扰效果最佳的重组干扰质粒.该质粒经慢病毒包装,并感染胰腺癌PaTu8988细胞株,建立稳定低表达B7-H3细胞株.应用实时定量PCR及蛋白质印迹法检测细胞B7-H3基因的表达抑制率.结果 携带干扰效果最好的shRNA的慢病毒感染PaTu8988细胞,建立了稳定低表达B7-H3基因的PaTu8988细胞株,其B7-H3 mRNA表达的抑制率达96.8％,B7-H3蛋白表达的抑制率达88.1％.结论 成功构建了人B7-H3-RNAi的慢病毒载体,并建立了稳定感染的低表达B7-H3基因的PaTu8988细胞株.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李德春	苏州大学附属第一医院普外科	242	677	11.0	16.0
2	赵华	苏州大学附属第一医院普外科	61	98	5.0	6.0
3	朱东明	苏州大学附属第一医院普外科	61	198	7.0	12.0
4	干文娟	苏州大学附属第一医院病理科	23	35	4.0	4.0
5	张子祥	苏州大学附属第一医院普外科	55	140	6.0	9.0
6	赵鑫	苏州大学附属第一医院普外科	63	311	10.0	15.0
7	李智	苏州大学附属第一医院介入科	47	164	7.0	11.0